核酸混檢是指將多個樣本進行混合后提取核酸進行擴增檢測的方法。為規(guī)范應用混檢技術(shù)進行新冠病毒篩查，7月21日國務(wù)院應對新型冠狀病毒肺炎疫情聯(lián)防聯(lián)控機制醫(yī)療救治組印發(fā)了《新冠病毒核酸篩查稀釋混樣檢測技術(shù)指引》，對我國新冠疫情常態(tài)化防控管理中的核酸混檢提出了指導。下面，請隨小編一起來了解學習該政策。

適用人群

指引明確提出新型冠狀病毒核酸篩查稀釋混樣技術(shù)僅適用于大人群樣本的篩查，稀釋混樣檢測結(jié)果不作為最終確診依據(jù)，在人群總體陽性率較低（低于0.1%）時更為適宜。

不適用于：

1.重點區(qū)域人群（近期有疫情發(fā)生的小區(qū)含確診病例和無癥狀感染者、老舊小區(qū)、人口密集小區(qū)、流動人口聚集區(qū)和近期離省外出人群）、其他不適合稀釋混樣檢測的人群；

2.醫(yī)療機構(gòu)就診患者。

以上表明，核酸混檢有其特定的適用場景，即在廣泛人群篩查時可以起到經(jīng)濟高效的快速初步篩選作用，為后面縮小目標范圍鎖定陽性樣本，節(jié)約試劑和檢測時間。而在新冠感染風險相對較高的重點區(qū)域和人群則不宜采取混檢策略，應單獨分檢，以防漏診。

操作流程

在操作流程方面，目前指引注意事項中提到稀釋混樣檢測必須提取核酸，原因在于核酸混檢方法的采樣對核酸濃度具有較大影響，指引方案中指出采樣時將拭子頭浸入含1～3ml病毒保存液中，再將采集的數(shù)個樣本（原則上不超過5個）各取200ul進行充分混合，形成混合待檢樣本。核酸提取與檢測過程按有關(guān)實驗室常規(guī)標準操作流程進行。每一次上樣擴增中，80個加樣孔用于加入混合樣本（如5混1，總計80×5個單樣本）；10個加樣孔用于單樣本（單樣本來自上述80×5個原液的隨機樣本）。

如果常規(guī)磁珠法核酸提取試劑盒取200ul樣本進行核酸提取，無法避免降低樣本濃度，5樣本混合后，樣本濃度將稀釋5倍。當混樣檢測，出現(xiàn)低濃度（弱陽性）樣本（1000copies/ml）時，5個樣本混合，該樣本濃度稀釋5倍則變成200copies/ml。

選擇高靈敏度的核酸檢測試劑是確保篩查結(jié)果準確性的重要條件。當前獲批的大部分核酸檢測試劑盒靈敏度低于200copies/ml，若采用常規(guī)磁珠法核酸提取試劑取200ul樣本提取核酸檢測，則遇到弱陽性樣本（濃度低于1000copies/ml）混樣檢測時，大部分廠家試劑無法檢出，容易造成漏檢。

圣湘生物的核酸提取試劑有磁珠法和快速核酸釋放劑法兩種，靈敏度都達到200copies/ml，完全可以滿足檢測靈敏度要求，目前新研發(fā)的磁珠法核酸提取試劑可將靈敏度提升到10copies/ml。根據(jù)國家衛(wèi)健委臨檢中心室間質(zhì)評EQA報告，在2020年第一次室間質(zhì)評活動中202010號樣本（128copies/ml）全國僅有6家實驗室檢出，測評用到的新冠核酸檢測試劑品牌，圣湘生物就是其中之一。

市場主流企業(yè)新冠核酸檢測試劑（熒光PCR法）性能參數(shù)對比

核酸提取方法

核酸提取目前主要采用的方法有磁珠法和快速核酸釋放劑法，二者均在臨床廣泛應用。

1、磁珠法

磁珠法提取核酸是通過對磁珠進行包被（如硅基、氨基、羧基等），從而實現(xiàn)對核酸的高通量、自動化提取。其原理是核酸與磁珠主要依靠靜電作用、疏水作用和氫鍵作用結(jié)合，細胞或組織在裂解液作用下釋放其中的核酸，此時經(jīng)過表面修飾的納米磁珠即與核酸進行特異性結(jié)合，形成“核酸-磁珠復合物”。然后在外加磁場的作用下將復合物分離，最后經(jīng)過洗脫非特異性吸附的雜質(zhì)、去鹽、純化后，得到欲提取的核酸。

圣湘生物使用的進口納米級磁珠表比面積大，吸附核酸多，磁響應性和穩(wěn)定性極好；配備的側(cè)吸式的磁力架磁場強度高，吸附高效；專利磁珠修飾技術(shù)，能夠增強核酸捕獲。創(chuàng)新的裂解配方，裂解能力強，無蛋白酶K，無需加熱，降低了氣溶膠污染風險。自主專利的無機溶液與有機溶液組合洗滌方式，去雜質(zhì)能力強，一次洗滌，核酸損失少，操作簡便。使用內(nèi)源性內(nèi)標監(jiān)控采樣、提取和擴增全過程，避免了假陰性。

2、快速核酸釋放劑法

快速核酸釋放劑法，使用化學釋放劑或裂解液直接裂解樣本釋放核酸，不需純化，比磁珠法具有更加快速簡便的優(yōu)勢，整個操作在一個反應管進行，減少操作誤差，提高檢驗結(jié)果可重復性。獨特的干擾物螯合封閉機制，分離雜質(zhì)，純化核酸，避免干擾。核酸免提取可減少物理因素對核酸的降解，保證核酸結(jié)構(gòu)的完整性，核酸無洗滌和損失，提高檢驗結(jié)果的靈敏度。

該方法操作簡便，不僅可以應用于臨床疑似患者的確診，也可用于疫情反彈地區(qū)多個樣本混合采集后的檢測，結(jié)合快速核酸檢測系統(tǒng)，能拓展更多應用場景，有效提高檢測效率，減輕工作人員實驗手工操作壓力，是磁珠法的有力補充手段。圣湘生物的快速核酸釋放劑法具有自主專利配方，檢測靈敏度性能超過普通國產(chǎn)同類產(chǎn)品，完全能夠滿足臨床單檢和混采檢測靈敏度要求。

圣湘生物可提供多種新冠病毒核酸檢測解決方案，基于快速核酸釋放技術(shù)和磁珠法技術(shù)均可實現(xiàn)不同通量的自動化操作，滿足不同場景、不同人群篩查就診的需求。如大規(guī)模人群篩查時，可以將多個標本混采在一管后，采用原始樣本上機的方式，避免因稀釋樣本降低靈敏度而造成的漏檢；醫(yī)療機構(gòu)就診患者、高危區(qū)域人群，需要進行快速確診分流時，兩種樣本核酸提取技術(shù)都可完美實現(xiàn)不同通量的自動化操作！

質(zhì)量控制

在質(zhì)量控制方面，指引對室內(nèi)質(zhì)控和室間質(zhì)評提出了要求。如每批上樣檢測應當在剩余加樣孔中設(shè)置1個弱陽性質(zhì)控樣本和三個陰性質(zhì)控樣本（2份生理鹽水和1份陰性混合樣本）。實驗室應參加省級及以上臨床檢驗中心組織的室間質(zhì)量評價（EQA）活動，按照活動要求完成質(zhì)評物接收、儲存、檢測和回報檢測結(jié)果等工作。指引注意事項中也建議對試劑檢測靈敏度進行評估，應選擇靈敏度較高的檢測試劑。

為達到指引的質(zhì)控要求，建議對目前市場上的各類核酸提取試劑進行混檢模式下的橫向測評，了解不同檢測試劑的靈敏度限值，以便在混檢策略時采用適宜的核酸提取試劑，發(fā)揮混檢在大規(guī)模篩查中的作用，為早期阻斷疫情傳播提供有力支撐。